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品牌 | CHI SCIENTIFIC/齐氏生物 | 货号 | 6-1705 |
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规格 | 10管/套 | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | Ames试验 |
WP2uvrA大肠杆菌 (Ames试验)
遗传毒性试验在食品、药物、化妆品、环境等各领域安全检测及评价上得到了广泛应用。其中比较常见的是Ames试验,也是经典的测试化学物或药物致突变实验,该法测定主要在培养皿中进行,具有简单、快速、精确而又灵敏的特点,被世界各国广泛采用。为了使以上试验条件更接近于哺乳动物的代谢情况,在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶(S9),可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。
齐氏生物提供的沙门 氏菌株(TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535)和 WP2uvrA大肠杆菌 (Ames试验), 经过鉴定,菌株特性与活菌数量符合Ames试验国家标准,并以甘油菌的形式提供,融化后可直接使用。 为了保证试验效果,建议搭配齐氏生物研发的S9代谢活化系统一起使用。
保存条件:干冰运输,-80℃保存。
注意事项:
在使用过程中要特别注意避免培养基污染菌株。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的健康和安全,请穿实验服并戴好一次性手套进行无菌操作。
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Ames鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验-ISO 10993-3,GB/T 16886.3,YY/T 0127.10
Ames试验全称鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验。
实验目的和原料:
鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株,在含微量组氨酸的培养基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成组氨酸,发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经代谢活化才有致变作用,在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶,可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。
菌株鉴定
用于测试的菌株,需经基因型和生物学性状鉴定,符合要求才能投入使用。
鉴定前先进行增菌培养。为鉴定结果可靠,需同时培养野生型TV菌株,作为测试菌基因型之对照。增菌培养用牛肉膏蛋白胨液体培养基,接种后于37℃,100r/min振荡培养12h左右,细菌生长相为对数期末,含菌数应为1×109个/ml~2×109个/ml。
鉴定项目:
(1)脂多糖屏障丢失(rfa)用接种环或一端挠起的接种针以无菌操作术取各菌株的增菌培养液,在营养琼脂平板上分别划平行线,然后用灭菌尖头镊夹取灭菌滤纸条,浸湿结晶紫溶液,贴放在平板上与各接种平行线垂直相交。盖好皿盖后倒置于37t温箱,培养24h后观察结果。
(2)R因子划线接种,贴放滤纸条及培养等均同上,唯滤纸条浸湿的药液不同,为氨苄青霉素钠溶液。TA102除pKM101外,还有pAQ1,载有抗四环素的基因,故另用滤纸条浸湿四环素溶液后贴放于划线接种的平板上。
(3)紫外线损伤修复缺陷(△uvrB)在营养琼脂平板上按上述方法划线接种后,一半接种线用黑玻璃遮盖,另一半暴露于紫外光下8sec,然后盖好皿盖并用黑纸包裹平皿,防止可见光修复作用。培养同上。
(4)自发回变预先制备底平板;向灭菌并在水浴内保温45℃的上层软琼脂中注入0.1ml菌液;混匀后倾于底平板上并铺平。平皿倒置于37℃温箱培养48h。
(5)回变特性——诊断性试验上层软琼脂中除菌液外,还注入已知阳性物之溶液,需活化系统者并加入S9mix,余同上。
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